研究冬虫夏草对抗体形成细胞的作用

添加日期：2010年5月8日 阅读：1242

　　冬虫夏草，始载于《本草纲目拾遗》。因其冬季为虫，夏季为草，故名。为麦角菌科真菌冬虫夏草Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德钦、丽江纳西族自治县等地，均为野生。主要功效：益肾补肺，止血化痰，止嗽定喘［1］。本实验主要研究冬虫夏草对抗体形成细胞作用，旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。
　　1  器材与方法
　　1.1  仪器和药物
　　低温冷冻离心机（Beckman,美国）；美国Multiskan产全自动酶标仪；恒温水浴箱（上海）；电泳仪（上海）；100目不锈钢网。冬虫夏草（购于附属医院中药房），取100 g加水1 000 ml，文火煎煮2 h，去渣浓缩为100 ml（浓度为**）备用。
　　1.2  动物及分组
　　取BALB/C纯系小鼠24只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为两组，每组12只，Ⅰ组为生理盐水对照组，Ⅱ组为药物实验组。
　　1.3  方法
　　Ⅰ组用生理盐水灌胃，1次/d，0.5 ml/(次·只)；Ⅱ组用冬虫夏草液灌胃，1次/d，0.5 ml/(次·只)，共灌10次。
　　1.4  检测项目
　　1.4.1  定量溶血分光光度测定法（QHS）［2］
　　本法体外测定B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量（以OD值表示），其结果可反映机体体液免疫功能。实验第5 天分别将5%的绵羊红细胞0.2 ml注入各组小鼠腹腔内。第11 天颈椎脱臼处死小鼠，常规取脾脏，然后脾细胞计数，调整细胞浓度至1×107/ml，平均每组每只小鼠设3支试管，每管依次加脾细胞悬液，0.2%绵羊红细胞（SRBC），1∶10新鲜豚鼠血清（补体）各1 ml混匀。另外分别设补体、脾细胞以及SRBC对照管各3支，置37℃水浴温育1 h，2 000 r/min离心5 min。取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450 nm波长处测OD值，作为QHS反应值。
　　1.4.2  特异玫瑰花环形成细胞检测（SRFC）［3］
　　取脾细胞0.1 ml（1×107/ml），1%SRFC 0.1 ml，小牛血清0.1 ml，试管内混匀，4℃放置2 h，加结晶紫溶液20 μl，计数500个淋巴细胞，求出SRFC/106脾细胞的形成率。
　　1.4.3  血清IgG检测［3］
　　采用对流免疫电泳实验，摘除小鼠眼球取血，分离血清，取不同稀释度血清10 μl加入阴极端琼脂板孔中，将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠IgG(1∶32)10 μl，将对流免疫电泳通电30 min后观察结果，以血清*高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。
　　2  结果
　　2.1  冬虫夏草对抗体形成细胞的影响
　　表1结果显示，用药组可促进抗体细胞形成，与对照组相比有显著性差异（P<0.05）。表1  冬虫夏草对抗体形成细胞的影响(略)
　　2.2  冬虫夏草对SRFC的影响
　　表2结果显示，用药组SRFC产生明显增强，与对照组相比有非常显著性差异（P< 0.01）。表2  冬虫夏草对SRFC的影响(略)
　　2.3  冬虫夏草对小鼠IgG的影响
　　表3结果显示，用药组可明显促进IgG产生，与对照组相比有显著性差异（P < 0.01）。表3  冬虫夏草对小鼠IgG的影响(略)
　　3  讨论
    冬虫夏草是临床上常用的中药。现代药理研究证实，冬虫夏草能显著增加小鼠血清溶菌酶的含量，极显著地提高绵羊红细胞的滴度，也能提高巨噬细胞的吞噬功能，提高淋巴细胞转化率和自然玫瑰花环形成率，且能明显增加血清IgG的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗应激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗肾衰作用。本研究重点从细胞及分子水平探讨冬虫夏草对抗体形成细胞，IgG分子的影响。实验证明，冬虫夏草能增强小鼠抗体形成（B细胞）活性，促进B细胞分化、增殖为浆细胞；药物组与对照组相比有显著性差异（P<0.05），冬虫夏草组SRFC数目明显高于对照组，与对照组相比有非常显著性差异（P< 0.01），冬虫夏草可使小数血清IgG含量增加，与对照组相比有非常显著性差异（P< 0.01）。提示如机体免疫功能下降者可口服冬虫夏草以增强机体免疫功能，预防某些疾病。本实验结果为临床应用冬虫夏草提供了实验依据。
        责任编辑：小季     WWW.1168.TV    2010-5-8 18:48:48

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