探讨黄精提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用

    添加日期:2010年5月8日 阅读:1860

      黄精为百合科黄柏属多种植物的干燥根茎,具补肾、滋阴润燥之功,用于滋补强身和治疗虚精亏、肺虚燥咳以及脾胃虚弱之症[1],已有很长历史,是中医常用药物之一。生长在湖北恩施富硒(恩施是我国的高硒区)深山丛林中的黄精,由于其富硒而使药效独特,疗效显著。本实验以小鼠为研究对象,建立低氧/复氧损伤的模型,主要研究黄精提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用,为黄精的临床应用和进一步研究开发提供理论依据和参考。
      1   材料
      1.1  药材黄精购于恩施中药材公司,采用双道束原子荧光光谱法测定硒的含量为0.58 μg/g。
      1.2  动物昆明种小鼠30只,体重18~22 g, ♂♀兼用,由同济医科大学实验动物中心提供。
      1.3  试剂活性氧(ROS)测定试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、酸性磷酸酶(ACP)测定试剂盒、过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品,氯胺酮( Ketamine)为美国Sigma公司产品。化学试剂均为分析纯。
      1.4  供试药液的制备取适量富硒黄精根茎粗粉,用水煎煮3次,滤过后,浓缩成0.5 g/ml的溶液,搅拌下加入乙醇至含醇量达70%,低温放置过夜,滤过,回收乙醇,再滤过浓缩制成1 g/ml的水溶液,115℃灭菌45 min,备用,以下简称提取物。
      1.5   仪器
      TG328A型电子分析天平;RE-52型旋转蒸发器;DL-50型超级恒温器;756MC型紫外可见光分光光度计;GL-20G高速冷冻离心机。
    2  方法和结果
      昆明种小鼠30只,随机分为3组,富硒黄精提取物组ig提取液20 ml/kg,对照组ig等量生理盐水,自由摄食饮水,连续给药5周。实验前30 min阳性药组ip氯胺酮0.08 g/kg,将小鼠放入钠石灰瓶(150 ml广口瓶,10 g钠石灰)中,每瓶放1只,塞紧瓶塞,8 min后取出,自由呼吸8 min后[2],将小鼠断头取血,放入带盖的肝素化试管中,立即盖紧,按试剂盒说明书测ROS,CAT,SOD,MDA和ACP各项指数,进行统计学处理后结果见表1~2。表1  黄精提取物对小鼠ROS和CAT的影响(略)表2  黄精提取物对小鼠SOD,MDA和ACP的影响 (略)
      结果表明:富硒黄精和氯胺酮均能降低ROS,且氯胺酮的作用显著强于富硒黄精;富硒黄精能增加SOD,CAT活性,氯胺酮能降低SOD活性,但对CAT活性影响无统计学意义,富硒黄精与氯胺酮均能减少MDA,但两者作用的差别无统计学意义,富硒黄精与氯胺酮对ACP影响均无统计学意义。
      3  讨论
      小鼠经低氧/复氧应激刺激后有大量氧自由基产生,它通过与不饱和脂肪酸作用引发脂质过氧化反应生成MDA,氧自由基及MDA通过多种途径造成细胞膜及亚细胞器膜结构破坏,导致损伤[3]。实验结果表明,富硒黄精对小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤有保护作用,谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px是一种重要的抗氧化酶,硒是GSH-Px的活性成分之一,富硒黄精根茎中富含硒,可以提高GSH-Px活力,从而对细胞产生保护作用;SOD是一种内源性自由基清除剂,本实验结果表明富硒黄精能增加SOD及CAT活性即达到保护作用。氯胺酮能降低ROS及MDA,且降低ROS的作用明显强于富硒黄精组,表明富硒黄精在小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤方面的保护作用比氯胺酮要温和一些,对低氧/复氧脂质过氧化损伤均有保护作用。

            责任编辑:小季     WWW.1168.TV    2010-5-8 18:14:52

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