研究栀子苷的镇痛和抗炎作用（一）

添加日期：2010年5月8日 阅读：1124

　　栀子是药食两用传统中药，药用栀子是茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，性寒味苦 ，归心、肺、三焦经 ,具有泻火除烦 、清热利尿 、凉血解毒之功效。用于热病心烦 ,黄疸尿赤 ,血淋涩痛 ,血热吐衄 ,目赤肿痛 ,火毒疮疡等证,外治扭挫伤痛。栀子果中含有含环烯醚萜苷类成分，其中栀子苷(geniposide)含量*高（含量可达6％），在栀子的药用效果中起重要作用［1］。本实验利用栀子黄色素生产过程中的废液提取和精制栀子苷［2］，主要对精制的栀子苷进行了镇痛和抗炎作用研究［1，2］。 
　　1  材料与方法 
　　1.1  材料 
　　1.1.1  药品与试剂杜冷丁，宜昌人福药业有限公司产品；栀子苷，本实验室提取纯化［2］；氢化可的松注射液，天津药业集团新郑股份有限公司产品；伊文思蓝，上海化学试剂采购供应站分装厂产品；角叉菜胶， Sigma公司。 
　　1.1.2  动物昆明种小鼠，18～22 g，湖北省动物防疫中心提供。 
　　1.2  方法［3，4］ 
　　1.2.1  栀子苷对小鼠镇痛作用的实验研究昆明种雌性小鼠40只，随机分为 5 组：生理盐水阴性对照组、栀子苷大剂量组（50 mg/kg）、栀子苷中剂量组（25 mg/kg）、栀子苷小剂量组（12.5 mg/kg）、杜冷丁阳性对照组。分组前进行筛选，调节小鼠热板测痛仪，使温度保持在（55.0±0.2）℃，每次取1只小鼠，放入测痛仪内，记录自放入到出现舔后足所需的时间(s)作为该鼠的痛阈值。凡小于5 s或大于30 s出现舔后足者，以及喜跳跃者，一律弃去不用。取合格者进行分组，标记，重新测量两次，取平均值作为该鼠给药前的基础痛阈值。 
　　栀子苷大、中、小剂量组连续3d 按时按量皮下注射给药，给药1次/d，给药时间间隔24h/次。每天给药前，先称小鼠体重，按小鼠的体重计算给药量后再给药，阴性对照组给予等量体积的生理盐水。第4天时，给药组称重后按小鼠体重皮下注射给药，5组按顺序给药。每组给药后30，60，90，120 min分别测定小鼠痛阈值。若小鼠在热板上停留60 s后仍微痛反应，则取出，按60s计算。比较给药组和对照组的差异情况，作组间t检验。 
　　1.2.2  栀子苷对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响 
　　取昆明种小鼠 40 只，雌雄各半，按性别体重随机分为 5 组，每组 8 只，打点标记后送入动物房饲养。5 组对应的分别是：生理盐水阴性对照组、栀子苷大剂量组（50 mg/kg）、栀子苷中剂量组（25 mg/kg）、栀子苷小剂量组（12.5 mg/kg）、杜冷丁阳性对照组。前3 d给药同“1.2.1”项。第4天时，称完小鼠体重后，空白对照组和给药组仍然按时按量皮下注射给药，并且与前次给药时间间隔24 h，杜冷丁阳性对照组*后给药。依每只小鼠给药时间为准，杜冷丁阳性组小鼠给药 300 min 后即阴性组及给药组给药1h后，腹腔注射0.6%的醋酸溶液0.1 ml/10 g。观察扭体反应并计算20 min内小鼠扭体数。比较给药组和对照组的差异情况，作t检验。 
　　1.2.3  栀子苷对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 
　　取昆明种小鼠 40 只，雄性，体重 18～22g，按体重随机分为 5 组：生理盐水阴性对照组、栀子苷大剂量组（50 mg/kg）、栀子苷中剂量组（25 mg/kg）、栀子苷小剂量组（12.5 mg/kg）、氢化可的松阳性对照组。每组 8 只，打点标记后送入动物房饲养。前3 d给药同“1.2.1”项。第 4 天时，称完小鼠体重后，前4组仍然按时按量皮下注射给药，并且与前次给药时间间隔24 h，氢化可的松阳性对照组*后给药。以每只小鼠给完药的时间为基准，氢化可的松阳性对照组给药30 min 后，给药组给药1 h后，各组小鼠右耳前后两面涂抹二甲苯（0.02 ml/只）；以每只小鼠致炎时间为准，15 min 后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用8 mm直径打孔器于左右耳廓相应部位各打一耳片，电子天平称重。以左右耳片的重量之差作为肿胀度。算出肿胀度和肿胀抑制率（%），并与对照组比较（t检验）。 
　　1.2.4  栀子苷对醋酸诱发小鼠毛细血管通透性的影响 
　　小鼠分组同“1.2.3”项。前 3 d给药同“1.2.1”项。第4天时，称完小鼠体重后，3 个给药组及阴性对照组仍然按时按量皮下注射给药，并且与前次给药时间间隔 24 h 。氢化可的松阳性对照组*后给药，皮下注射氢化可的松。以每只小鼠给完药的时间为基准，氢化可的松阳性对照组给药 30 min 后，空白及给药组给药 1 h 后，尾静脉注射 0.5%的伊文思蓝溶液 0.1 ml/10 g 体重，后立即腹腔注射 0.6% 醋酸溶液 0.1 ml/10 g 体重，以注射完醋酸溶液的时间为基准，20 min后脱颈椎处死小鼠，剪开腹腔，用8 ml生理盐水分 4 次清洗腹腔，合并洗涤液，3 000 r/min 离心15 min，取上清液，于 590 nm 处测定其吸光值。 
　　1.2.5  栀子苷对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响 
　　小鼠分组同“1.2.3”项。前3 d给药同“1.2.1”项。第4天时，称完小鼠体重后，空白对照组和3个给药组仍然按时按量皮下注射给药，并且与前次给药时间间隔24 h，氢化可的松阳性对照组*后给药。依每只小鼠给药时间为准，氢化可的松阳性组小鼠给药 30 min 后,阴性及给药组给药 1 h后致炎，即在每只动物右后足注射 1% 角叉菜胶 50 μl 致炎；以每组小鼠致炎时间为准，致炎后3 h处死小鼠，称左、右后足重量，以左、右后足重量的差值作为肿胀厚度。比较给药组和对照组的差异情况，作t检验。 
        责任编辑：小季     WWW.1168.TV    2010-5-8 9:29:37

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